Изменение № 2 ГОСТ
Р 51600-2000 Молоко. Методы определения наличия антибиотиков
Утверждено и введено в действие Приказом
Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 23.01.2008
№ 1-ст
Дата
введения 2008-07-01
Раздел 1. Заменить слова: «иммуноферментный» на
«рецепторные».
Раздел 2 дополнить ссылкой:
«ГОСТ
29169-91 (ИСО 648-77) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной
отметкой».
Подпункт 4.2.1 после слова «Термостат» дополнить словами:
«или блок термостатируемых ячеек».
Пункт 4.2 дополнить подпунктами - 4.2.10, 4.2.11:
«4.2.10 Тестовый набор «Copan Test®» - комплект, включающий герметично укупоренные пробирки,
собранные в блоки, и содержащие споры Вас. stearothermophilus var. calidolactis, помещенные в агар с питательными веществами и
индикатором бромкрезолпурпуром; пипетки мерные вместимостью 0,1 см3
одноразового использования и цветовую шкалу [3].
4.2.11 Пипетки вместимостью 0,1 см3 для отбора
образцов молока для исследования по ГОСТ
29169».
Подпункты 4.4.2, 4.4.4 изложить в новой редакции:
«4.4.2 Осторожно, не повреждая упаковки, отрезают от блока
необходимое число ампул или пробирок (с учетом контрольной пробы) и маркируют.
Оставшиеся ампулы или пробирки хранят в холодильнике при температуре (6 ± 2)
°С.
4.4.4 Подготовка к анализу ампул или пробирок - по 4.2.9 или
4.2.10.
Осторожно, не повреждая упаковки, отрезают от блока необходимое
число ампул или пробирок (с учетом контрольной пробы) и маркируют. Оставшиеся
ампулы или пробирки хранят в холодильнике при температуре (6 ± 2) °С».
Пункт 4.5 изложить в новой редакции: «4.5 Проведение анализа
4.5.1 Проведение анализа с использованием ампул «Delvotest® SP», «Delvotest® SP-NT» или «Delvotest® SP MINI-NT»
4.5.1.1 Соединительной частью шприца прокалывают укупорку
ампул по 4.2.3 или 4.2.9.
4.5.1.2 В каждую открытую ампулу по 4.2.3 пинцетом помещают
по одной таблетке питательной среды «Delvotest® SP»,
взятой из колпачка бутылочки по 4.4.3. Затем бутылочку плотно закрывают
колпачком и хранят при температуре (20 ± 2) °С.
4.5.1.3 Шприцем-дозатором отбирают 0,1 см3
анализируемого молока и вносят в каждую ампулу по 4.5.1.2 или 4.2.9. Для каждой
пробы анализируемого молока используют новый наконечник. Оставшееся молоко
сохраняют до конца анализа в холодильнике при температуре (6 ± 2) °С.
4.5.1.4 Ампулы помещают в термостат и выдерживают при
температуре (64,0 ± 0,5) °С в течение 3 ч.
4.5.2 Проведение анализа с использованием тестового набора
«Сорап Test®»
4.5.2.1 Одноразовой мерной пипеткой отбирают 0,1 см3
анализируемого молока и вносят в пробирку с приоткрытой фольгой по 4.2.10.
Оставшееся молоко сохраняют до конца анализа в холодильнике при температуре (6
± 2) °С.
4.5.2.2 Пробирки с анализируемым молоком закрывают фольгой и
помещают в блок термостатируемых ячеек и выдерживают при температуре (64,5 ±
0,5) °С в течение 3 ч.
4.5.2.3 Контрольное определение проводят в соответствии с
4.5.1, 4.5.2. В ампулу или пробирку вносят 0,1 см3 предварительно
восстановленного по ГОСТ
23454 препарата СКИВ».
Подпункт 4.6.1 изложить в новой редакции:
«4.6.1 Ампулы или пробирки извлекают из термостата или блока
термостатируемых ячеек и определяют цвет содержимого».
Подпункты 4.6.2, 4.6.3 после слова «ампул» дополнить
словами: «или пробирок».
Подпункт 4.7.1 и таблицу 2 изложить в новой редакции:
«4.7.1 Наименьшие пределы определения антибиотиков
представлены в таблице 2.
Таблица
2
|
Наименование антибиотика
|
Наименьший предел
определения,
Ед/г (мкг/г), с использованием
|
|
Copan Test® (СН-АТК)
|
Delvotest® SP-NT,
Delvotest® SP MINI-NT
|
|
DH-Стрептомицин
|
<1,0
|
-
|
|
Амоксициллин
|
0,002
|
0,003
|
|
Ампициллин
|
<0,002
|
0,003
|
|
Бензилпенициллин
|
-
|
0,0025
|
|
Гентамицин
|
0,1
|
0,400
|
|
Дапсон
|
0,002
|
-
|
|
Дигидрострептомицин
|
-
|
2,500
|
|
Диклоксациллин
|
0,01
|
0,010
|
|
Доксициклин
|
0,15
|
-
|
|
Клоксациллин
|
0,01
|
0,020
|
|
Левомицетин
(хлорам-феникол)
|
-
|
7,500
|
|
Линкомицин
|
-
|
0,300
|
|
Нафциллин
|
0,005
|
0,010
|
|
Неомицин
|
0,5
|
0,400
|
|
Оксациллин
|
0,005
|
0,010
|
|
Окситетрациклин
|
0,25
|
0,400
|
|
Пенициллин
|
0,001
|
-
|
|
Спектиномицин
|
>0,3
|
-
|
|
Спирамицин
|
>0,2
|
-
|
|
Стрептомицин
|
<1,0
|
-
|
|
Сульфадиазин
|
0,05
|
-
|
|
Сульфадиметоксин
|
0,05
|
-
|
|
Сульфадоксин
|
0,1
|
-
|
|
Сульфаметазин
|
0,1
|
-
|
|
Сульфаметоксазол
|
<0,05
|
-
|
|
Сульфанометозин
|
<0,05
|
-
|
|
Сульфатиозол
|
0,05
|
-
|
|
Тетрациклин
|
0,25
|
0,300
|
|
Тиамфеникол
|
>0,1
|
-
|
|
Тилозин
|
0,05
|
0,100
|
|
Тилмикозин
|
0,75
|
-
|
|
Триметроприм
|
0,1
|
-
|
|
Хлорамфеникол
|
>5,0
|
-
|
|
Хлортетрациклин
|
0,25
|
0,300
|
|
Цефазолин
|
0,05
|
-
|
|
Цефалексин
|
>0,045
|
0,060
|
|
Цефалониум
|
0,025
|
0,015
|
|
Цефаперазон
|
0,025
|
0,060
|
|
Цефапирин
|
0,0025
|
0,005
|
|
Цефацетрил
|
-
|
0,020
|
|
Цефкуином
|
0,03
|
-
|
|
Цефтиофур
|
0,05
|
-
|
|
Цефуроксим
|
0,06
|
-
|
|
Эритромицин
|
>0,2
|
0,250
|
Стандарт после таблицы 2 дополнить
наименованием раздела 5:
«5 Рецепторные методы».
Раздел 5. Заменить номера пунктов и подпунктов: 5 на 5.1; 5.1
на 5.1.1; 5.2 на 5.1.2; 5.2.1 на 5.1.2.1; 5.2.2 на 5.1.2.2; 5.2.3 на 5.1.2.3;
5.2.4 на 5.1.2.4; 5.3 на 5.1.3; 5.3.1 на 5.1.3.1; 5.4 на 5.1.4; 5.4.1 на
5.1.4.1; 5.4.2 на 5.1.4.2; 5.5 на 5.1.5; 5.5.1 на 5.1.5.1; 5.5.2 на 5.1.5.2;
5.5.3 на 5.1.5.3; 5.5.4 на 5.1.5.4; 5.5.5 на 5.1.5.5; 5.5.6 на 5.1.5.6; 5.6 на
5.1.6; 5.6.1 на 5.1.6.1; 5.6.2 на 5.1.6.2; 5.6.3 на 5.1.6.3.
Пункт 5.1 Заменить слово: «Метод» на «Рецепторный метод».
Подпункт 5.1.1. Заменить слова: «иммобилизованными
специфическими антителами» на «специфическими белковыми рецепторами».
Подпункт 5.1.4.2. Заменить слова: «в пробирке по 5.2.4» на
«в пробирке по 5.1.2.4».
Подпункт 5.1.5.1. Заменить слова: «пипетку по 5.2.4» на
«пипетку по 5.1.2.4».
Раздел 5 дополнить пунктом - 5.2:
«5.2 Рецепторный метод с коллоидным золотом
5.2.1 Сущность метода
5.2.1.1 Метод основан на проведении реакции
комплексообразования антибиотиков бета-лактамного типа со специфическими
белковыми рецепторами, меченными коллоидным золотом, и последующем визуальном
выявлении оставшихся свободными меченых рецепторов путем хроматографии на
полосках хроматографической бумаги, содержащих в виде соответствующих линий
реакционную и контрольную зоны.
5.2.2 Аппаратура, материалы и реактивы
5.2.2.1 Термостат или блок термостатируемых ячеек,
позволяющий поддерживать температуру (47,5 ± 0,5) °С.
5.2.2.2 Холодильник бытовой по ГОСТ
16317.
5.2.2.3 Часы механические с сигнальным устройством по ГОСТ
3145.
5.2.2.4 Тест-набор «Beta Star®» [4], включающий флаконы со специфическими рецепторами,
меченными коллоидным золотом; полоски хроматографической бумаги с зоной
исследуемого молока и контрольной зоной; шприц-дозатор вместимостью 0,2 см3
с наконечниками.
5.2.3 Отбор проб
Отбор проб - по ГОСТ
9225. Пробы хранят в холодильнике в течение 24 ч при температуре (6 ± 2)
°С.
5.2.4 Подготовка к анализу
5.2.4.1 Термостат или блок термостатируемых ячеек нагревают
до температуры (47,5 ± 0,5) °С и выдерживают при этой температуре не менее 5
мин.
5.2.4.2 Флакон встряхивают для осаждения содержимого в нем
на дно.
5.2.5 Проведение анализа
5.2.5.1 Шприцем-дозатором с наконечником отбирают 0,2 см3
анализируемого молока и переливают во флакон по 5.2.4.2. Флакон закрывают
крышкой и встряхивают до полного растворения сухих веществ без образования
пены.
5.2.5.2 Помещают флакон в термостат или блок
термостатируемых ячеек по 5.2.2.1.
5.2.5.3 Не менее чем через 3 мин термостатирования во
флакон, находящийся в термостате или в блоке термостатируемых ячеек, помещают
входящую в комплект полоску хроматографической бумаги.
5.2.5.4 Хроматографирование проводят в течение 2 мин. Затем
полоску хроматографической бумаги извлекают из флакона.
5.2.6 Обработка результатов
5.2.6.1 Сравнивают интенсивность цвета окрашенных в красный
цвет зон, появляющихся после проведения процедуры по 5.2.5.4 в виде линий на
полосках хроматографической бумаги.
5.2.6.2 Зона на верхней части полоски является контрольной.
Если ее окрашивания не произошло после выполнения требований по 5.2.5.3,
5.2.5.4, то повторяют все процедуры в соответствии с 5.2.
5.2.6.3 Зона исследуемого молока расположена под контрольной
зоной. Большая или равная интенсивность цвета контрольной зоны, а также
отсутствие окраски зоны образца является признаком наличия антибиотиков
бета-лактамного типа в молоке.
5.2.6.4 Меньшая интенсивность цвета контрольной зоны, по
сравнению с интенсивностью цвета зоны под ней, является признаком отсутствия
антибиотиков.
5.2.6.5 Контрольное определение проводят в соответствии с
5.1 и 5.2. В ампулу или пробирку вносят 0,1 см3 предварительно
восстановленного по ГОСТ
23454 препарата СКИВ».
Пункт 5.7. Заменить номер пункта: 5.7 на 5.3.
Пункт 5.3 изложить в новой редакции:
«5.3 Метрологические характеристики
Наименьшие пределы определения антибиотиков бета-лактамного
типа представлены в таблице 3.
Таблица
3
|
Наименование
антибиотика
|
Наименьший предел
определения,
Ед/г (мкг/г), с использованием
|
|
Бета-лактам «Snap®»
|
Beta Star®
|
|
Амоксициллин
|
0,007
|
0,002
|
|
Ампициллин
|
0,005
|
0,002
|
|
Диклоксациллин
|
0,02
|
0,005
|
|
Клоксациллин
|
0,03
|
0,005
|
|
Нафциллин
|
0,07
|
0,008
|
|
Оксациллин
|
0,04
|
0,005
|
|
Пенициллин
|
0,003*
|
-
|
|
Пенициллин
G
|
-
|
0,002
|
|
Цефазолин
|
0,02
|
-
|
|
Цефалексин
|
0,025
|
-
|
|
Цефалониум
|
0,04
|
0,007
|
|
Цефаперазон
|
0,01
|
0,005
|
|
Цефапирин
|
0,011
|
0,008
|
|
Цефацетрил
|
0,05
|
-
|
|
Цефкуином
|
0,02
|
-
|
|
Цефтиофур
|
0,006
|
0,075
|
|
*
0,003 мкг активного вещества равно 0,005 Ед активности.
|
Приложение А. Библиографию
дополнить позициями - [3], [4]:
«[3] Тестовый набор «Copan Test®» Дания, CHR HANSEN.
Российское представительство: Россия, 105318 Москва, ул. Щербаковская, 53,
корп. 17, 3 этаж, ООО «Хр. Хансен».
[4] Тест-набор «Beta Star®» Дания, CHR HANSEN.
Российское представительство: Россия, 105318 Москва, ул. Щербаковская, 53,
корп. 17, 3 этаж, ООО «Хр. Хансен».
Библиографические данные. Ключевые слова после слов
«антибиотики бета-лактамного типа» дополнить словами: «сульфаниламидные
препараты».
(ИУС № 4 2008 г.)
