4.1. Методы контроля. Химические факторы
Методические указания МУК 4.1.1969-05
"Определение остаточных количеств ацетохлора в
ботве, корнеплодах сахарной свеклы и корнеплодах моркови методом газожидкостной
хроматографии"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 21 апреля 2005
г.)
Дата введения: 1 июля
2005 г.
Введены впервые
1. Вводная часть
Действующее вещество: ацетохлор.
Структурная формула:
2-хлор-N-этоксиметил-6'-этилацето-о-толуидид (IUPAC).
Эмпирическая формула: C14H20ClNO2.
Мол. масса:
269,8.
Химически чистый препарат - маслянистая жидкость
темно-желтого цвета с температурой кипения 125 °С при
40 Па. Коэффициент распределения н-октанол/вода: KowlogP = 3,03 (20
°С).
Растворимость (25 °С) в воде 223 мг/л, хорошо растворим в
ацетоне, диэтиловом эфире, бензоле, н-гексане, хлороформе, этаноле, этил-ацетате и толуоле.
В почве период полураспада DT50 8 - 18 дней.
Оральная токсичность (LD50) для крыс 2148 мг/кг.
Область применения
Системный гербицид корневого действия, подавляющий
однолетние злаковые и некоторые виды двудольных сорняков в период их
прорастания.
2. Методика определения ацетохлора в ботве и
корнеплодах сахарной свеклы и корнеплодах моркови методом газожидкостной
хроматографии
2.1. Основные положения
2.1.1. Принцип метода
Метод определения ацетохлора
основан на экстракции пестицида органическими растворителями и очистке
экстракта на патроне Диапак С-16. Количественное
определение проводят методом газожидкостной хроматографии с использованием
детектора электронного захвата (ДЭЗ или ДПР).
2.1.2. Избирательность метода
Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий
подготовки проб и хроматографирования. Присутствие
других пестицидов, близких по химическому строению и области применения,
определению не мешает.
2.1.3. Метрологическая характеристика метода
Метрологическая характеристика метода представлена в
таблице.
Таблица
Метрологическая характеристика метода
|
Объект анализа
|
Предел обнаружения, мг/кг
|
Диапазон измеряемых концентраций, мг/кг
|
Среднее значение определения, %, (n = 24)
|
Стандартное отклонение S, %
|
Доверительный интервал среднего %, n = 24, Р = 0,95
|
|
Ботва свеклы
|
0,005
|
0,01 - 0,2
|
95
|
10
|
7
|
|
Корнеплоды свеклы
|
0,005
|
0,01 - 0,2
|
98
|
9
|
6
|
|
Корнеплоды моркови
|
0,005
|
0,01 - 0,2
|
89
|
13
|
8
|
2.2. Реактивы, материалы
|
Ацетохлор,
аналитический стандарт ≥ 96 %
|
|
|
Ацетон, чда
|
ГОСТ 2603-79
|
|
Вода дистиллированная
|
ГОСТ 7602-76
|
|
н-Гексан,
хч
|
ТУ 6-09-3375-78
|
|
Концентрирующие патроны
|
|
|
Диапак
С-16 (0,6 г)
|
|
|
Хлористый метилен, чда
|
ТУ-2631-020-11291058-96
|
2.3. Приборы и посуда
|
Газовый хроматограф "Цвет
550" или аналогичный с ДЭЗ
|
|
|
Колонка стеклянная 1 м × 3
мм с 5 % SE-30 на хроматоне N-супер
(0,125 - 0,160 мм)
|
|
|
Весы аналитические ВЛА-200 или
аналогичные
|
ГОСТ 34104-80Е
|
|
Весы технические ВЛКТ-500
|
ГОСТ 24104-80
|
|
Установка ультразвуковая
"Серьга"
|
ТУ 3.836.008
|
|
Микрошприц
МШ-10, МШ-10М
|
ТУ 2.833.106
|
|
Аллонж НШ 14,5
|
|
|
Шприц с разъемом типа Льюер объемом не менее 10 мл
|
|
|
Насос водоструйный
|
МРТУ 42 861-64
|
|
Колбы плоскодонные на шлифах КШ500
29/32 ТС
|
ГОСТ 10384-72
|
|
Воронки лабораторные В-75-110
|
ГОСТ
25336-82
|
|
Цилиндры мерные на 100 см3,
500 см3
|
ГОСТ 1774-74
|
|
Колбы мерные на 100 см3
|
ГОСТ
1770-74
|
|
Пипетки на 1, 2, 5, 10 см3
|
ГОСТ 22292-74
|
|
Стаканы химические
|
ГОСТ
25336-82Е
|
|
Допускается
использование оборудования с аналогичными или лучшими характеристиками
|
2.4. Отбор проб
Отбор проб производится в соответствии с
"Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции,
пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" (№ 2051-79 от 21.08.79).
2.5. Подготовка к определению
2.5.1. Подготовка и очистка реактивов и растворителей
Растворители, используемые для анализа, специальной
подготовки не требуют. Рекомендуется проверить чистоту применяемых
растворителей. Для этого 100 мл растворителя упаривают на вакуумном ротационном
испарителе до объема 1 мл и хроматографируют. При
обнаружении примесей, которые могут мешать определению, растворители очищают
общепринятыми методами.
2.5.2. Кондиционирование колонки
Перед началом анализа колонку, не присоединяя к детектору,
кондиционируют в токе инертного газа (азот) при температуре 250 °С в течение 8 - 10 ч.
2.5.3. Приготовление стандартного и градуировочных растворов
Для приготовления стандартного раствора с концентрацией 1
мг/мл количественно переносят 50 мг аналитического стандарта ацетохлора в мерную колбу на 50 мл и растворяют навеску в
ацетоне. Из полученного раствора готовят градуировочные
растворы с концентрациями 2; 1; 0,5; 0,2 мкг/мл методом последовательного
разбавления гексаном.
Для внесения в образец при определении полноты извлечения
используют соответствующие растворы ацетохлора в
ацетоне.
2.5.4. Построение градуировочного графика
Для построения градуировочного
графика зависимости площади пика от концентрации ацетохлора
в растворе в хроматограф вводят по 2 мкл градуировочных
растворов (не менее 3 параллельных измерений для каждой концентрации, не менее
4 точек по диапазону измеряемых концентраций). Измеряют площади пиков и строят
график зависимости среднего значения площади (мВ х с)
пика от концентрации ацетохлора в градуировочном
растворе (мкг/мл).
2.5.5. Подготовка концентрирующего патрона Диапак
С-16 для очистки экстракта
Патрон устанавливают на аллонж с отводом для соединения с
водоструйным насосом. Сверху в патрон вставляют шприц с разъемом типа Льюер объемом не менее 10 мл (используется как емкость для прокачивания водно-ацетонового экстракта и элюирующего растворителя). Для активации и
кондиционирования патрона через него последовательно пропускают 10 мл ацетона и
10 мл дистиллированной воды. Элюаты отбрасывают.
Скорость потока через патрон не должна превышать 1 - 2 мл/мин. После
кондиционирования патрона нельзя допускать высыхания поверхности картриджа и
попадания в него пузырьков воздуха. Сразу после приготовления патрон используют
для работы.
2.5.6. Проверка хроматографического поведения ацетохлора на патронах Диапак
С-16
Готовят водный модельный раствор. Для этого к 150 мл 3 %-ного водно-ацетонового раствора добавляют 1 мл стандартного
раствора ацетохлора в ацетоне с концентрацией 1
мкг/мл. Пропускают полученный раствор через предварительно активированный
патрон Диапак С-16 со скоростью не более 2 мл/мин.
После подсушивания патрона в течение 15 мин в токе азота элюируют
ацетохлор 20 мл хлористого метилена, отбирая фракции
по 5 мл. Каждую фракцию упаривают на роторном испарителе при
температуре не выше 35 °С. Сухой остаток растворяют в 1 мл гексана и хроматографируют.
Определяют профиль вымывания ацетохлора с сорбента.
Примечание: профиль вымывания ацетохлора может измениться
при использовании другой партии патронов Диапак С-16.
2.5.7. Подготовка приборов и средств измерения
Установка и подготовка всех приборов и средств измерения
проводится в соответствии с требованиями стандартов и технической документации.
2.6. Проведение определения
Навеску ботвы или корнеплодов свеклы и моркови (20 г)
измельчают, помещают в коническую колбу с притертой пробкой, добавляют 70 мл 3
%-го водно-ацетонового раствора и экстрагируют на ультразвуковой ванне в
течение 5 мин. Экстракцию повторяют дважды. Экстракты фильтруют через бумажный
фильтр. Объединенный экстракт пропускают через подготовленный патрон Диапак С-16 со скоростью не более 2 мл/мин. После
подсушивания патрона в течение 15 мин в токе инертного газа ацетохлор
элюируют хлористым метиленом. Элюат
упаривают досуха на роторном испарителе при температуре не
выше 35 °С. Сухой остаток растворяют в 1 - 4 мл гексана
и хроматографируют.
2.6.3. Условия хроматографирования
Газовый хроматограф "Цвет 550М" с ДПР или
аналогичный. Колонка стеклянная 3 м × 3 мм с 5 % SE-30 на хроматоне N-супер (0,125 - 0,160
мм). Температура колонки 210 °С, испарителя 250 °С,
детектора 310 °С. Скорость газа-носителя (азот) через колонку 82,8 см3/мин.
Объем вводимой пробы 1 мкл. Линейность детектирования
сохраняется в пределах 0,2 - 2,0 нг.
2.6.6. Обработка результатов анализа
Количественное определение проводят методом абсолютной
калибровки, содержание ацетохлора в пробе (X, мг/кг)
вычисляют по формуле:
где
Н1
- высота (площадь) пика ацетохлора в стандартном
растворе, мм (мВ × с);
Н2
- высота (площадь) пика ацетохлора в анализируемой
пробе, мм (мВ × с);
V - объем
экстракта, подготовленного для хроматографирования,
мл;
Р
- навеска анализируемого образца, г;
С
- концентрация ацетохлора в
стандартном растворе, мкг/мл.
Концентрацию ацетохлора в
анализируемом образце вычисляют как среднее из 2 параллельных определений.
Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор ацетохлора с концентрацией 2 мкг/мл, разбавляют.
3. Требования техники безопасности
При проведении работы необходимо соблюдать требования
инструкции "Основные правила безопасной работы в химической
лаборатории", общепринятые правила безопасности при работе с органическими
растворителями, токсичными веществами, а также инструкции по эксплуатации газового
хроматографа и электрооборудования до 400 В.
4. Контроль погрешности измерений
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости
результатов измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ
2335-2003. ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного
химического анализа.
5. Разработчики
Долженко В.И., Цибульская
И.А., Остроухова О.К.
Всероссийский научно-исследовательский институт защиты
растений, Санкт-Петербург.
|
Руководитель
Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека,
Главный государственный санитарный
врач Российской Федерации
|
Г.Г.
Онищенко
|
