4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ
В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ, СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОМ
СЫРЬЕ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

СБОРНИК МЕТОДИЧЕСКИХ УКАЗАНИЙ
МУК 4.1.1145-03

ВЫПУСК 1

МОСКВА
2004

1. Сборник подготовлен: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к. хим. н. Довгилевич А.В.); Всероссийским НИИ фитопатологии (А.М. Макеев и др.); Всероссийским НИИ защиты растений (В.И. Долженко и др.); Санкт-Петербургским НИИ лесного хозяйства (Маслаков С.Е., Л.В. Григорьева и др.), при участии Департамента Госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов).

2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Минздраве России.

3. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.

4. Введены впервые.

УТВЕРЖДАЮ

Главный государственный санитарный

врач Российской Федерации, Первый

заместитель Министра здравоохранения

Российской Федерации

Г.Г. Онищенко

Дата введения: 1 января 2003 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций Трифлусульфурон-метила
в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной
жидкостной хроматографии

1. Вводная часть

Фирма производитель: Дюпон де Немур (Швейцария).

Торговое название: КАРИБУ.

Действующее вещество: трифлусульфурон-метил.

Метиловый эфир 2-[4-диметиламино-6-(2,2,2-трифторэтокси)-1,35-триазин-2-илкарбомоилсульфонил]-мета-толуиловой кислоты (ИЮПАК).

C₁₇H₁₉F₃N₆O₆S                                                                                                   М. м. 492,4

Бесцветное кристаллическое вещество.

Температура плавления: 150 - 154 °С.

Давление паров при 25 °С: менее 1 × 10^-2 mPa.

Растворимость в органических растворителях (г/л при 20 °С): ацетон - 120, ацетонитрил - 80, гексан - менее 0,0016, дихлорметан - 580, метанол - 7, толуол - 2, хлороформ - 160, этилацетат - 27.

Растворимость в воде зависит от кислотности среды и составляет при рН 3 - 1,0; рН 5 - 2,7; рН 7 - 110; рН 9 - 11000 мг/л.

Трифлусульфурон-метил стабилен в виде сухой пленки на стекле и относительно устойчив в растворах ацетона, ацетонитрила, дихлорметана и этилацетата. В водных растворах стабилен при рН больше 7 и быстро гидролизуется при рН менее 4.

Агрегатное состояние в воздухе рабочей зоны - аэрозоль.

Краткая токсикологическая характеристика

Острая пероральная токсичность (LD₅₀) для крыс - более 5000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD₅₀) для кроликов - более 2000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LC₅₀) для крыс - более 5,1 мг/л воздуха.

ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 1,0 мг/м³, в атмосферном воздухе - 0,01 мг/м³.

Область применения препарата

Трифлусульфурон-метил - новый послевсходовый гербицид из группы сульфонилмочевин, эффективный в борьбе с двудольными сорняками на плантациях сахарной свеклы.

2. Методика измерения концентраций Трифлусульфурон-метила в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Методика основана на определении Трифлусульфурон-метила с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.

Отбор проб воздуха осуществляется концентрированием аэрозоля на бумажные фильтры «синяя лента».

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

2.1.2. Избирательность метода

В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии компонентов препаративной формы, а также пестицидов, применяемых при возделывании сахарной свеклы.

2.1.3. Метрологическая характеристика метода (Р = 0,95)

Число параллельных определений - 6

Предел обнаружения в хроматографируемом объеме - 10 нг (измерение по п. 2.7.1); 2,5 нг (измерение по п. 2.7.2)

Предел обнаружения в воздухе - 0,08 мг/м³ (при отборе 25 л воздуха)

Диапазон определяемых концентраций - 0,08 - 1,6 мг/м³

Среднее значение определения - 95,4 %

Стандартное отклонение (S) - 5,69 %

Относительное стандартное отклонение (DS) - 2,32 %

Доверительный интервал среднего - 5,96 %

Суммарная погрешность измерения не превышает 25 %

2.2. Реактивы, растворы и материалы

Трифлусульфурон-метил с содержанием д. в. 98,8 %, (Дюпон де Немур, Швейцария)
Ацетон, чда	ГОСТ 2603-79
Ацетонитрил, для хроматографии, хч	ТУ-6-09-4326-76
Вода бидистиллированная или деионизованная
Кислота ортофосфорная, хч и 0,2 %, по объему, водный раствор	ГОСТ 6552-80
Спирт метиловый	ГОСТ 6995-77
Бумажные фильтры «синяя лента», обеззоленные, предварительно промытые ацетоном	ТУ 6-09-2678-77

2.3. Приборы, аппаратура, посуда

Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором фирмы Perkin-Elmer (США) или аналогичный
Хроматографическая колонка стальная, длиной 25 см, внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая Zorbax ODS, зернением 5 мкм
Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа
Жидкостный хроматограф Милихром с ультрафиолетовым детектором
Хроматографическая колонка стальная, длиной 64 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная Сепароном С18, зернением 5 мкм
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или аналогичный	ТУ 25-11-917-76
Весы аналитические типа ВЛА-200	ГОСТ 34104-80Е
Насос водоструйный	ГОСТ 10696-75
Аспирационное устройство типа ЭА-1 или аналогичное	ТУ 25-11-1414-78
Барометр	ТУ 2504-1797-75
Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена деления 1 °С, пределы измерения 0 - 55 °С	ГОСТ 215-73Е
Колбы мерные, вместимостью 100 и 1000 мл	ГОСТ 177-74Е
Цилиндры мерные, вместимостью 10, 50, 500 мл	ГОСТ 1770-74Е
Колбы грушевидные со шлифом, вместимостью 100 мл	ГОСТ 10394-72
Стаканы химические, вместимостью 100 мл	ГОСТ 25336-82Е
Пипетки, вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл	ГОСТ 20292-74
Воронки химические, конусные, диаметром 34 - 40 мм	ГОСТ 25336-82Е
Фильтродержатели
Стеклянные палочки

2.4. Отбор проб

Отбор проб воздуха рабочей зоны следует осуществлять в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны».

В течение 15 мин последовательно отбирают 3 пробы, для чего воздух с объемным расходом 5,0 л/мин аспирируют в течение 5 мин через фильтр «синяя лента».

Фильтры с отобранными пробами, упакованные в полиэтиленовые пакеты, можно хранить в холодильнике при 4 - 6 °С в течение 10 дней, в морозильной камере при 12 - 18 °С в течение месяца.

2.5. Подготовка к определению

2.5.1. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

Отмеряют 500 мл ацетонитрила, 100 мл метанола, переносят в колбу на 1000 мл, добавляют 400 мл воды и 0,8 мл ортофосфорной кислоты, перемешивают и дегазируют.

2.5.2. Кондиционирование колонки

Промыть колонку для ВЭЖХ смесью ацетонитрил-метанол-вода, содержащей 0,2 % об. ортофосфорной кислоты, (50 : 10 : 40, по объему) в течение 30 мин при скорости подачи растворителя 100 мкл/мин (измерение по п. 2.7.1) или 1 мл/мин (измерение по п. 2.7.2).

2.5.3. Приготовление стандартных растворов

Основной стандартный раствор трифлусульфурон-метила с содержанием 1 мг/мл готовят растворением 0,1 г вещества в ацетонитриле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранится в холодильнике в течение месяцев.

Рабочие стандартные растворы с концентрацией 2,0; 5,0; 10,0; 20,0 и 30,0 мкг/мл (измерение по п. 2.7.1) готовят из основного стандартно: раствора трифлусульфурон-метила соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой для ВЭЖХ (п. 2.5.1).

Рабочие стандартные растворы с концентрацией 0,125; 0,25; 0,75 и 1,25 мкг/мл (измерение по п. 2.7.2) готовят из основного стандартного раствора трифлусульфурон-метила соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой для ВЭЖХ (п. 2.5.1).

Рабочие растворы сразу после приготовления помещаются на холод, где хранятся не более 12 часов.

2.5.4. Построение градуировочного графика

2.5.4.1. Градуировочный график А (измерение по п. 2.7.1).

Для построения градуировочного графика в инжектор хроматографа вводят по 5 мкл рабочего стандартного раствора трифлусульфурон-метила с концентрацией 2,0; 3,0; 5,0; 10,0; 20,0 и 30,0 мкг/мл.

2.5.4.2. Градуировочный график В (измерение по п. 2.7.2).

Для построения градуировочного графика в инжектор хроматографа вводят по 20 мкл рабочего стандартного раствора трифлусульфурон-метила с концентрацией 0,125; 0,25; 0,5; 0,75 и 1,25 мкг/мл.

Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят градуировочный график (А или В) зависимости высоты хроматографического пика в мм от концентрации трифлусульфурон-метила в растворе в мкг/мл.

2.6. Описание измерения

2.6.1. Измерение по п. 2.7.1

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 мл, заливают 10 мл ацетона, оставляют на 5 - 7 минут, периодически перемешивая. Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетона объемом 10 мл.

Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 1 мл подвижной фазы для ВЭЖХ и немедленно хроматографируют или помещают в холодильник. Подготовленные для хроматографирования пробы можно хранить на холоду не более 12 часов.

2.6.2. Измерение по п. 2.7.2

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 мл, заливают 10 мл подвижной фазы для ВЭЖХ, оставляют на 5 - 7 минут, периодически перемешивая. Раствор сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой, в мерный цилиндр вместимостью 20 - 25 мл. Фильтр обрабатывают новой порцией подвижной фазы для ВЭЖХ объемом 5 мл. Доводят объем объединенного экстракта до 15 мл, фильтруют и хроматографируют.

2.7. Условия хроматографирования

2.7.1. Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Милихром (Россия)

Колонка стальная длиной 64 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная Сепароном С18, зернением 5 мкм

Температура колонки	комнатная
Подвижная фаза	ацетонитрил-метанол - 0,2 %, по объему ортофосфорная кислота (50 : 10 : 40, по объему)
Скорость потока элюента	100 мкл/мин
Рабочая длина волны	230 нм
Чувствительность	0,4 ед. абсорбции на шкалу
Объем вводимой пробы	5 мкл
Время выхода трифлусульфурон-метила	около 5 мин
Линейный диапазон детектирования	10 - 150 нг

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 30 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.

2.7.2. Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Perkin-Elmer (США)

Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая Zorbax ODS, зернением 5 мкм

Температура колонки:	комнатная
Подвижная фаза	ацетонитрил-метанол - 0,2 %, по объему, ортофосфорная к лота (50 : 10 : 40, по объему)
Скорость потока элюента	1 мл/мин
Рабочая длина волны	230 нм
Чувствительность	0,01 ед. абсорбции на шкалу
Объем вводимой пробы	20 мкл
Время выхода трифлусульфурон-метила	около 12 мин
Линейный диапазон детектирования	2,5 - 25 нг

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 1,25 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.

2.8. Обработка результатов анализа

Содержание трифлусульфурон-метила рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

, где

Х - содержание трифлусульфурон-метила в пробе воздуха, мг/м³;

С - концентрация трифлусульфурон-метила в хроматографируемом растворе, найденная по калибровочному графику, мкг/мл;

W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;

V - объем пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенного к стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 20 °С), дм³.

, где

Т - температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), °С;

Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.;

и - расход воздуха при отборе пробы, дм³/мин;

t - длительность отбора пробы, мин.

3. Требования техники безопасности

При выполнении измерений концентраций трифлусульфурон-метила следует соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях в соответствии с «Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемиологического режима и личной гигиены при работе в лечебных и санитарно-эпидемиологических учреждениях системы МЗ СССР» (№ 2455-81 от 20.10.81), а также требования, изложенные в документации на прибор.

4. Разработчики

Ракитский В.Н., член-корр. РАМН, проф., Юдина Т.В., Федорова Н.Е. - Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (ФНЦГ им. Ф.Ф. Эрисмана).

141000, г. Мытищи Московской обл., ул. Семашко, д. 2. Лаборатория аналитических методов контроля.

Телефон: (095) 586-12-76.

СОДЕРЖАНИЕ