4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ
В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ, СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОМ
СЫРЬЕ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

Измерение концентраций Тиаметоксама методом
высокоэффективной жидкостной хроматографии
в воздухе рабочей зоны и атмосферном воздухе

СБОРНИК МЕТОДИЧЕСКИХ УКАЗАНИЙ
МУК 4.1.1143-02

ВЫПУСК 1

МОСКВА
2004

1. Сборник подготовлен: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к. хим. н. Довгилевич А.В.); Всероссийским НИИ фитопатологии (А.М. Макеев и др.); Всероссийским НИИ защиты растений (В.И. Долженко и др.); Санкт-Петербургским НИИ лесного хозяйства (Маслаков С.Е., Л.В. Григорьева и др.), при участии Департамента Госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов).

2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Минздраве России.

3. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.

4. Введены впервые.

УТВЕРЖДАЮ

Главный государственный санитарный

врач Российской Федерации, Первый

заместитель Министра здравоохранения

Российской Федерации

Г.Г. Онищенко

Дата введения: 1 января 2003 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций Тиаметоксама методом
высокоэффективной жидкостной хроматографии
в воздухе рабочей зоны и атмосферном воздухе

1. Вводная часть

Фирма производитель: НОВАРТИС АГРО АГ (Швейцария).

Торговое название: АКТАРА.

Действующее вещество: тиаметоксам (ЦГА 293343).

3-(2-хлор-тиазол-5-илметил)-5-метил-[1,3,5]оксадиазинан-4-илиден-N-нитроамин (ИЮПАК).

C₈H₁₀ClN₅O₃S                                                                                                    M. м. 291,7

Белый кристаллический порошок без запаха.

Температура плавления: 139,1 °С.

Давление паров при 25 °С: 6,6 × 10^-9 Па.

Коэффициент распределения н-октанол/вода: К logP_ow = -0,13.

Растворимость при 25 °С (г/л): ацетонитрил - 78, ацетон - 42,5, дихлорметан - 43, метанол - 10,2, этилацетат - 5,7, толуол - 0,6, вода - 4,1

Стабильность к гидролизу при 25 °С: DT₅₀ более 1 года (рН 5 и 7), 4,2 дня (рН 9).

В присутствии света в водных фотолитических условиях тиаметоксам быстро деградирует с периодом полураспада 2,3 дня.

Может присутствовать в воздухе рабочей зоны в виде аэрозоля.

Краткая токсикологическая характеристика

Острая пероральная токсичность (LD₅₀) для крыс - 1560 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD₅₀) для крыс - более 2000 мг/г; острая ингаляционная токсичность (LC₅₀) для крыс - 3720 мг/м³ воздуха. Тиаметоксам не оказывает раздражающего действия на кожу и слизистую оболочку глаз кролика. LC₅₀ для рыб более 100 мг/л (96 ч).

Гигиенические нормативы

ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,4 мг/м³.

ОБУВ в атмосферном воздухе - 0,01 мг/м³.

Область применения препарата

Тиаметоксам является системным инсектицидом. Он воздействует на никотиново-ацетилхолиновый рецептор нервной системы насекомых, обладает быстрой желудочной и контактной активностью. Вещество обладает широким спектром активности против сосущих, грызущих и почвенных насекомых на овощных, зерновых и цветочных культурах, фруктовых и цитрусовых деревьях, хлопчатнике и рисе.

2. Методика измерения концентраций Тиаметоксама в воздухе рабочей зоны и атмосферном воздухе методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на определении вещества с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором.

Отбор проб воздуха осуществляется концентрированием аэрозоля на бумажные фильтры «синяя лента». Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

2.7.2. Избирательность метода

В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии компонентов препаративной формы.

2.1.3. Метрологическая характеристика метода (Р = 0,95)

Число параллельных определений                                                                6

Предел обнаружения в хроматографируемом объеме                                 1 нг

Предел обнаружения в воздухе при отборе 20 дм³ воздуха                        0,005 мг/м³

Диапазон определяемых концентраций                                              0,005 - 0,05 мг/м³

Среднее значение определения                                                                     95,0 %

Стандартное отклонение (S)                                                                          6,85 %

Относительное стандартное отклонение (DS)                                            2,96 %

Доверительный интервал среднего                                                               7,61 %

Суммарная погрешность измерения                                                  не превышает 23 %

2.2. Реактивы и материалы

Тиаметоксам с содержанием д. в. 99,3 %, (Новартис, Швейцария)
Ацетон, чда	ГОСТ 2603-79
Ацетонитрил для жидкостной хроматографии	ТУ 6-09-4326-76
Вода дистиллированная, деионизованная или перегнанная над KMnО4
Спирт метиловый, хч	ГОСТ 6995-77
Бумажные фильтры «синяя лента», обеззоленные, предварительно промытые ацетоном, затем ацетонитрилом	ТУ 6-09-2678-77

2.3. Приборы, аппаратура, посуда

Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором фирмы Altex (США) или аналогичный
Хроматографическая колонка стальная, длиной 20 см, внутренним диаметром 4 мм, заполненная Лихросорбом Р8, зернением 7 мкм
Хроматографическая колонка стальная, длиной 15 см, внутренним диаметром 4 мм, заполненная Диасорбом-130-С16 Т или Диасорбом-130-С8 Т, зернением 7 мкм (АО БиоХимМак, РФ; 119899, Москва, Ленинские горы)
Микрошприц для жидкостного хроматографа, вместимостью 50 - 100 мкл
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или аналогичный	ТУ 25-11-917-76
Весы аналитические типа ВЛА-200	ГОСТ 34104-80Е
Насос водоструйный	ГОСТ 10696-75
Аспирационное устройство типа ЭА-1 или аналогичное	ТУ 25-11-1414-78
Барометр	ТУ 2504-1797-75
Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена деления 1 °С, пределы измерения 0 - 55 °С	ГОСТ 215-73Е
Колбы мерные, вместимостью 100 и 1000 мл	ГОСТ 1770-74
Цилиндры мерные, вместимостью 10, 25 и 500 мл	ГОСТ 1770-74Е
Колбы грушевидные со шлифом, вместимостью 100 мл	ГОСТ 10394-72
Пробирки центрифужные	ГОСТ 25336-82Е
Стаканы химические, вместимостью 100 мл	ГОСТ 25336-82Е
Пипетки, вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл	ГОСТ 20292-74
Воронки химические, конусные, диаметром 34 - 40 мм	ГОСТ 25336-82Е
Груша резиновая
Фильтродержатели
Стеклянные палочки

2.4. Отбор проб

Отбор проб воздуха рабочей зоны следует осуществлять в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны» или ГОСТ 17.2.4.02-81 «ОПА. Общие требования к методам определения загрязняющих веществ в воздухе населенных мест».

Воздух со скоростью 4 л/мин пропускают через фильтр «синяя лента», помещенный в фильтродержатель.

Для измерения концентрации вещества на уровне 0,005 мг/м³ следует отобрать 20 л воздуха.

Фильтры с отобранными пробами, помещенные в герметически закрываемые склянки, можно хранить в морозильной камере при температуре -12 °С в течение 30 дней, в холодильнике при 4 - 6 °С - в течение 7 дней.

2.5. Подготовка к определению

2.5.1. Очистка растворителей

Органические растворители перед началом работы очищают, сушат и перегоняют в соответствии с типовыми методиками. Ацетонитрил сушат над пентоксидом фосфора и перегоняют; отогнанный растворитель повторно перегоняют над углекислым калием. Ацетон очищают перегонкой над перманганатом калия и поташом (на 1 л ацетона 10 г KMnO₄ и 2 г K₂CO₃).

2.5.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

Отмеряют 330 мл метанола, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл, добавляют 670 мл бидистиллированной или деионизованной воды, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

2.5.3. Кондиционирование колонки

Промыть колонку для ВЭЖХ смесью метанол-вода (33 : 67, по объему) в течение 30 - 45 мин при скорости подачи растворителя 0,7 мл/мин. Включить детектор и подождать стабилизации базовой линии (5 - 15 мин).

2.5.4. Приготовление стандартных растворов

Основной стандартный раствор тиаметоксама с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г препарата, содержащего 99,3 % д. в., в метаноле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранится в морозильной камере при -12 °С не более месяца.

Рабочие стандартные растворы с концентрацией 0,02; 0,04; 0,1 и 0,2 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора тиаметоксама соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой для ВЭЖХ (п. 2.5.2). Рабочие растворы хранят в холодильнике при температуре не выше 4 °С не более 2 дней.

2.5.5. Построение калибровочного графика

Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 50 мкл рабочего стандартного тиаметоксама с концентрацией 0,02; 0,04; 0,1 и 0,2 мкг/мл.

Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты хроматографического пика в мм от концентрации тиаметоксама в растворе в мкг/мл.

2.6. Описание определения

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 мл, заливают 10 мл ацетонитрила, помещают на встряхиватель на 10 - 12 минут. Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетонитрила объемом 10 мл.

Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 30 °С, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха, остаток растворяют в 5 мл подвижной фазы для ВЭЖХ (п. 2.5.2), фильтруют или центрифугируют для удаления взвеси и хроматографируют.

2.7. Условия хроматографирования

2.7.2. Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Altex (США)

Колонка стальная длиной 20 см, внутренним диаметром 4 мм, заполненная Лихросорбом RP8, зернением 7 мкм.

Температура колонки                                                   комнатная

Подвижная фаза                                                             метанол-вода (33 : 67, по объему)

Скорость потока элюента                                             0,7 мл/мин

Рабочая длина волны                                                    255 нм

Чувствительность                                                          0,01 ед. абсорбции на шкалу

Объем вводимой пробы                                                50 мкл

Время удерживания тиаметоксама                              5,14 - 5,62 мин

Линейный диапазон детектирования                          110 нг

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,2 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ (п. 2.5.2).

Альтернативные неподвижные фазы:

·        Хроматографическая колонка стальная (15 см × 4 мм), заполненная Диасорбом-130-С8 Т (5 мкм).

Условия хроматографирования те же.

Время удерживания тиаметоксама: около 5 мин 30 с.

·       Хроматографическая колонка стальная (15 см × 4 мм), заполненная Диасорбом-130-С16 Т (7 мкм).

Условия хроматографирования те же.

Время удерживания тиаметоксама: около 5 мин.

2.8. Обработка результатов анализа

Содержание тиаметоксама рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

, где

Х - содержание тиаметоксама в пробе воздуха, мг/м³;

С - концентрация тиаметоксама в хроматографируемом растворе, найденная по калибровочному графику, мкг/мл;

W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;

V - объем пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенного к стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 20 °С), дм³.

3. Требования техники безопасности

Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами.

4. Разработчики

Дубовая Л.В., Макеев А.М., к. биол. н.

ВНИИ фитопатологии, 143050 Московская обл., п/о Большие Вяземы, тел. 592-92-20.

СОДЕРЖАНИЕ