4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ
В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ, СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОМ
СЫРЬЕ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

Измерение концентраций Ципродинила
в воздухе рабочей зоны методом
газожидкостной хроматографии

СБОРНИК МЕТОДИЧЕСКИХ УКАЗАНИЙ
МУК 4.1.1025-01

Выпуск 1

МОСКВА
2004

1. Сборник подготовлен: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к. хим. н. Довгилевич А.В.); Всероссийским НИИ фитопатологии (А.М. Макеев и др.); Всероссийским НИИ защиты растений (В.И. Долженко и др.); Санкт-Петербургским НИИ лесного хозяйства (Маслаков С.Е., Л.В. Григорьева и др.), при участии Департамента Госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов).

2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Минздраве России.

3. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.

4. Введены впервые.

УТВЕРЖДАЮ

Главный государственный санитарный

врач Российской Федерации, Первый

заместитель Министра здравоохранения

Российской Федерации

Г.Г. Онищенко

Дата введения: 1 января 2003 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций Ципродинила
в воздухе рабочей зоны методом
газожидкостной хроматографии

1. Вводная часть

Фирма производитель: Новартис (Швейцария).

Торговое название: Хорус.

Название действующего вещества по ИСО: Ципродинил.

Название действующего вещества по ИЮПАК: 4-циклопропил-6-метил-N-фенил-пиримидин-2-амин.

C₁₄H₁₅N₃                                                                                                                M. м. 225,3

Химически чистый Ципродинил представляет собой кремовое кристаллическое вещество с запахом.

Температура плавления - 75,9 °С.

Давление паров при 25 °С 5,1 × 10^-4 Ра (модификация А) и 4,71 × 10^-4 Ра (модификация Б).

Растворимость в органических растворителях (25 °С, г/л растворителя): ацетон - 610, этанол - 160, н-гексан - 30, толуол - 460, р-октанол - 160.

Растворимость в воде (мг/л) - 20 (рН 5,5), 13 (рН 7,0), 15 (рН 9,0).

Коэффициент перераспределения октанол/вода K_ow logP = 3,9 (рН 5,0), 4,0 (рН 7,0), 4,0 (рН 9,0) при 25 °С.

Величина рК_а 4,44.

Ципродинил устойчив к гидролизу (период полуразложения больше 1 года при рН 4 - 9). Фотолитически быстро разрушается в воде (ДТ₅₀ 0,4 - 13,5 дней).

Ципродинил является среднестойким соединением, с периодом полуразложения в почве 20 - 60 дней. В растениях метаболизируется посредством гидроксилирования 6-метильной группы, а также пиримидинового и фенильного ядра.

Краткая токсикологическая характеристика

Ципродинил относится к малотоксичным соединениям по острой пероральной (ЛД₅₀ для крыс более 2000 мг/кг) и дермальной токсичности (ЛД₅₀ для крыс более 2000 мг/кг) и умеренно опасным по ингаляционной (ЛК₅₀ (4 ч) более 1200 мг/м³) токсичности.

Не оказывает раздражающего действия на кожу и глаза кроликов.

В России установлены следующие гигиенические нормативы: ПДК в воздухе рабочей зоны - 0,8, в атмосферном воздухе - 0,01 мг/м³.

Область применения препарата

Ципродинил - системный фунгицид, хорошо проникающий в растение через листья и передвигающийся преимущественно по ксилеме. Эффективно подавляет рост мицелия различных патогенов, в т.ч. устойчивых к фунгицидам из групп триазолов, имидазолов и др. В рекомендуемых дозах не оказывает отрицательного действия на растения.

2. Методика измерения концентраций Ципродинила в воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Методика основана на определении Ципродинила методом газожидкостной хроматографии с термоионным детектором на азот.

Отбор проб воздуха осуществляется концентрированием на последовательно соединенные бумажные фильтры «синяя лента» и трубки силикагелем.

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

2.1.2. Избирательность метода

В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии компонентов препаративной формы, а также пестицидов, применяемых в интенсивной технологии выращивания яблок и винограда (хлор- и фосфорорганические пестициды, сим-триазины, пиретроиды, триазолы и дитиокарбаматы).

2.1.3. Метрологическая характеристика метода (Р = 0,96)

Число параллельных определений - 6.

Предел обнаружения в хроматографическом объеме - 0,6 нг.

Предел обнаружения в пробе - 0,05 мг/м³ (при отборе 20 л воздуха).

Диапазон определяемых концентраций - 0,05 - 0,75 мг/м³.

Среднее значение определения - 91,8 %.

Стандартное отклонение (S) - 2,63 %.

Относительное стандартное отклонение (DS) - 1,07 %.

Доверительный интервал среднего - 2,75 %.

Суммарная погрешность измерения ± 19 %.

2.2. Реактивы, растворы, материалы и оборудование

2.2.1. Реактивы, материалы и растворы

Ципродинил с содержанием д. в. 98,9 %, фирма Новартис
Азот, осч	ГОСТ 9293-74
Водород газообразный из баллона	ГОСТ 3022-80
Ацетон, осч	ГОСТ 2603-79
Вода дистиллированная	ГОСТ 7602-72
Кальция хлорид	ГОСТ 4161-77
Силикагель марки АСК, Е, зернением 0,5 - 1,0 мм, предварительно промытый хлороводородной кислотой, разбавленной водой 1 : 1, затем водой до отрицательной реакции промывных вод на ионы хлора (при добавлении раствора азотно-кислого серебра), высушенный в сушильном шкафу и прокаленный в муфельной печи при 200 °С в течение 4 ч	ГОСТ 3956-76
Кислота хлороводородная, хч, разбавленная водой по объему	ГОСТ 3118-77
Вода дистиллированная	ГОСТ 7602-72
Серебро азотно-кислое, хч 1 %-ный водный раствор	ГОСТ 1277-75
Насадки для хроматографических колонок готовые:
3 % OV (0,16 - 0,20 мм) на Инертоне-супер, Хемапол, Чехия
5 % SE-30 (0,16 - 0,20 мм) на Хроматоне N-AW, Хемапол, Чехия.
Бумажные фильтры «синяя лента», предварительно промытые этанолом	ТУ 6-09-1705-77
Стекловата

2.2.2. Приборы и оборудование

Аппарат для встряхивания АВУ-6С или аналогичный	ТУ 64-1-2451-78
Газовый хроматограф «Цвет» или аналогичный, снабженный термоионным детектором с пределом детектирования по азоту в азобензоле 1,5 × 10-12 г/см3 или другой с аналогичными или улучшенными характеристиками
Хроматографическая колонка стеклянная, длиной 1 или 3 м, внутренним диаметром 2 - 3 мм
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или аналогичный	ТУ 25-11-917-76
Весы аналитические ВЛА-200 или аналогичные	ГОСТ 34104-80Е
Воронки химические конические, диаметром 34 - 37 мм	ГОСТ 25336-82Е
Аспирационное устройство	ТУ 64-1862-77
Барометр	ТУ 2504-1797-75
Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена деления 1 °С, пределы измерения 0 - 55 °С	ГОСТ 215-73Е
Колбы грушевидные со шлифом, вместимостью 50 и 100 мл	ГОСТ 10394-72
Колбы мерные, вместимостью 50 и 100 мл	ГОСТ 1770-74
Эксикатор вакуумный	ГОСТ 25336-82Е
Шкаф сушильный
Печь муфельная
Цилиндры мерные, вместимостью 10 мл	ГОСТ 1770-74Е
Стаканы химические, вместимостью 50 мл	ГОСТ 25336-82Е
Пипетки, вместимостью 0,1, 1, 5 и 10 мл	ГОСТ 20292-74Е
Пробирки с пришлифованными пробками, вместимостью 10 мл	ГОСТ 1770-74Е
Стеклянные U-образные трубки, высотой 10 - 11 см, внутренним диаметром 4 мм
Воронки химические конусные, диаметром 34 - 40 мм	ГОСТ 25336-82Е
Фильтродержатель
Сито с диаметром отверстий 0,5 - 1,0 мм
Стеклянные палочки

2.4. Отбор проб

2.4.1. Подготовка к отбору проб

Конец стеклянной U-образной трубки уплотняют тампоном из стекловаты, через другой конец трубки с помощью воронки заполняют 1,5 см³ силикагеля и ее второй конец также уплотняют тампоном из стекловаты. Перед отбором проб заполненные трубки активируют путем нагревания в муфельной печи до 150 - 200 °С и выдерживания при этой температуре в течение 40 - 50 мин. Активированные трубки, закрытые заглушками, можно хранить в эксикаторе под вакуумом не более 10 суток.

2.4.2. Отбор проб

Анализируемый воздух со скоростью 2 л/мин аспирируют через последовательно соединенные бумажный фильтр «синяя лента», помещенный в фильтродержатель, и трубку с силикагелем.

Фильтры с отобранными пробами, упакованные в полиэтиленовые пакеты, можно хранить в холодильнике при температуре 4 °С не более 5 дней, при температуре -20 °С - 1 месяц.

2.5. Подготовка к определению

2.5.1. Подготовка и кондиционирование колонки

Готовую насадку (3 % OV-17 на Инертоне-супер) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 270 °С в течение 10 - 12 ч.

2.5.2. Приготовление стандартных растворов

Стандартный раствор Ципродинила с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,01 г вещества в ацетоне в мерной колбе на 100 мл. Раствор может храниться в холодильнике не более месяца.

Рабочие стандартные растворы с концентрацией 0,2; 0,5; 1,0; 2,0 и 3,0 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением ацетоном.

Растворы могут храниться в холодильнике в течение 10 дней.

2.5.3. Построение градуированного графика

Для построения градуировочного графика в испаритель хроматографа вводят по 3 мкл рабочего стандартного раствора Ципродинила с концентрацией 0,2; 0,5; 1,0; 2,0 и 3,0 мкг/мл.

Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят средние значения высот хроматографических пиков для каждой концентрации.

Строят градуировочный график зависимости высоты хроматографического пика, мм, от концентрации Ципродинила в растворе, мкг/мл.

2.6. Описание определения

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан емкостью 50 мл, заливают 10 мл этанола и оставляют на 10 мин, периодически перемешивая. Растворитель сливают через воронку в грушевидную колбу, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр затем обрабатывают новой порцией этанола объемом 4 - 5 мл.

Силикагель из трубки переносят в пробирку емкостью 10 мл, заливают 3 мл этанола, закрывают пробкой и встряхивают 1,5 - 2 мин. Растворитель также сливают в грушевидную колбу. Операцию повторяют дважды.

Объединенный экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 45 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают током теплого воздуха. Остаток растворяют в 5 мл ацетона и 3 мкл полученного раствора анализируют по п. 2.7.

2.7. Условия хроматографирования градуировочных и анализируемых растворов

2.7.1. Условия хроматографирования

Хроматограф газовый «Цвет-570» с ТИД.

Неподвижная фаза - 3 % OV-17 на Инертоне-супер (0,16 - 0,20 мм).

Колонка стеклянная, длиной 1 м, внутренним диаметром 3 мм.

Рабочая шкала электрометра 32 × 10¹⁰ Ом.

Скорость движения ленты самописца 200 мм/ч.

Температура испарителя - 290 °С, термостата колонки 220 °С, детектора - 340 °С, переходной камеры - 364 °С.

Газовый режим: азот - 35, водород - 15, воздух - 180 - 200 мл/мин.

Абсолютное время удерживания - 3 мин.

Линейность детектирования сохраняется в пределах 0,6 - 9,0 нг.

Объем вводимой пробы - 3 мкл.

2.7.2. Альтернативные условия хроматографирования

Альтернативная фаза: 5 % SE-30 на Хроматоне N-AW(0,16 - 0,20 мм), длина колонки 3 м, внутренний диаметр 3 мм.

Температура термостата колонки - 250 °С, детектора - 340 °С, испарителя - 290 °С.

Газовый режим: азот - 30, водород - 13, воздух - 140 мл/мин.

Абсолютное время удерживания - 1 мин 07 с.

Рабочая шкала электрометра 32 × 10.

Скорость движения ленты самописца 200 мм/ч.

Линейный диапазон детектирования 1,5 - 15 нг.

Каждую анализируемую пробу вводят в испаритель хроматографа 2 - 3 раза и вычисляют среднюю высоту пика. Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 3,0 мкг/мл разбавляют ацетоном.

2.8. Обработка результатов анализов

Концентрацию Ципродинила в воздухе рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

, где

C - концентрация Ципродинила в воздухе, мг/м³;

Н₁ - высота (площадь) пика образца, мм;

Н₀ - высота (площадь) пика стандарта, мм;

А - концентрация стандартного раствора, мкг/мл;

V₁ - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования (мл);

V₂ - объем пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенного к стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 20 °С), л.

3. Требования техники безопасности

Помещение, в котором проводится определение Ципродинила, обязательно должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией.

Работу с образцами, стандартами и растворителями следует проводить в вытяжном шкафу с использованием индивидуальных средств защиты.

Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами.

4. Разработчики

Калинин В.А., профессор, к. с-х. н., Довгилевич Е.В., к. биол. н., Калинина Т.С., к. с-х. н., Довгилевич А.В., к. хим. н.

Московская сельскохозяйственная академия им. К.А. Тимирязева. 127550, Москва, Тимирязевский пр., 2, кафедра химических средств защиты растений. Телефон: 976-02-20. Факс: 976-43-26.

СОДЕРЖАНИЕ