Государственное
санитарно-эпидемиологическое нормирование Российской Федерации
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Определение содержания денатурирующих
добавок (ингредиентов) в этиловом спирте
и спиртосодержащей продукции
из всех видов сырья
Сборник
методических указаний
Определение массовой доли
октаацетата сахарозы
в этиловом спирте и спиртосодержащей продукции
из всех видов сырья методом газожидкостной хроматографии
МетодическиЕ
указаниЯ
МУК 4.1.1496-03
Минздрав
России
Москва
2004
Определение содержания денатурирующих
добавок (ингредиентов) в этиловом спирте и спиртосодержащей продукции из всех
видов сырья: Сборник методических указаний. - М.: Федеральный центр
Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004.
1. Разработаны Федеральным
научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана Минздрава России (Т.В. Юдина, Н.Е.
Федорова, С.И. Волчек, В.Н. Волкова).
2. Рекомендованы к
утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому
нормированию Минздрава России.
3. Утверждены 29 июня 2003 г.
и введены 30 июня 2003 г. Главным государственным санитарным врачом Российской
Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации
Г.Г. Онищенко.
4. Введены впервые.
УТВЕРЖДАЮ
Главный государственный
санитарный
врач Российской Федерации,
Первый заместитель Министра здравоохранения
Российской Федерации
Г.Г. Онищенко
29 июня 2003 г.
Дата введения: 30 июня 2003
г.
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ.
ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Определение массовой доли
октаацетата сахарозы
в этиловом спирте и спиртосодержащей продукции из всех
видов сырья методом газожидкостной хроматографии
Методические указания
Настоящий документ устанавливает газохроматографический метод
определения массовой концентрации октаацетата сахарозы в этиловом спирте и
спиртосодержащей продукции из всех видов сырья в диапазоне 0,01 - 0,2 % масс.
Сахароза октаацетат -
октаацетат α-D-глюкопиранозил-β-D-фруктофуранозида.
С28Н38О19 М.
м. 678,6
Твердое вещество белого или
желтоватого цвета.
2.
Характеристика погрешности измерений
Методика обеспечивает
выполнение измерений с погрешностью (δ), не превышающей ± 13 %, при
доверительной вероятности 0,95.
Метод основан на измерении концентрации
вещества с помощью газовой хроматографии с использованием детектора ионизации в
пламени.
Нижний предел измерения в
хроматографируемом объеме пробы (0,5 мм3) - 0,4 мкг.
Измерению не мешают
диэтиловый эфир, уксусный и кротоновый альдегиды, диэтилфталат, метиловый,
н-пропиловый, изопропиловый и трет-бутиловый спирты, ацетон.
4.1. Средства измерений
Газовый хроматограф
«Цвет-570», снабженный
пламенно-ионизационным
детектором с
пределом детектирования по
нонану
0,8 × 10-11
г/см3
Весы лабораторные общего
назначения
2-го класса
точности, например, (ВЛР-200) ГОСТ
24104
Пипетки градуированные 2-го
класса точности,
вместимостью
0,1; 2,0; 5,0 и 10,0 см3 ГОСТ
29227
Микрошприц
МШ-1 ГОСТ
8043
Колбы мерные
2-50-2 и 2-100-2 ГОСТ
1770
Допускается использование
средств измерений с аналогичными или лучшими метрологическими характеристиками.
4.2.
Реактивы
Октаацетат
сахарозы Фармакопейная
статья
Спирт
этиловый ректификованный ГОСТ
Р 51652
или ГОСТ
18300
4.3.
Вспомогательные устройства и материалы
Азот
газообразный из баллона, осч ГОСТ
9293
Вата стеклянная или
стеклоткань
Водород газообразный
из баллона ГОСТ 3022
Воздух
газообразный из баллона ГОСТ
9-010
Воронки
химические конусные № 2 и 3 ГОСТ
8613
Колонка хроматографическая
стеклянная,
длиной 1 м, внутренним
диаметром 3 мм
Колбы круглодонные или
плоскодонные на
шлифе,
вместимостью 100 см3 ГОСТ
10394
Насос
водоструйный стеклянный ГОСТ
25336
Газхром Q (0,16
- 0,20 мм) с 5 % ОV-210,
Хемапол, Чехия
Допускается применение
другого оборудования и хроматографических колонок с аналогичными техническими
характеристиками, обеспечивающими аналогичное разделение.
При выполнении измерений
необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими
реактивами по ГОСТ
12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ
12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на
прибор.
Помещение должно
соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь
средства пожаротушения по ГОСТ
12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм,
установленных ГН
2.2.5.686-98 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в
воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда
осуществляется по ГОСТ
12.0.004.
К выполнению измерений и обработке
их результатов допускают специалиста, имеющего высшее или среднее специальное
химическое образование или опыт работы в химической лаборатории, прошедшего
обучение, освоившего метод в процессе тренировки и уложившегося в нормативы
оперативного контроля при выполнении процедур контроля погрешности.
При выполнении измерений в
лаборатории должны быть соблюдены следующие условия:
·
температура
воздуха (20
± 5) °С;
·
атмосферное
давление 84,0
- 106,7 кПа (630 - 800 мм рт. ст.);
·
влажность
воздуха не
более 80 % при температуре 25 °С;
·
напряжение
в сети от
187 до 242 В;
·
частота
переменного тока (50
± 1) Гц.
8.1. Подготовка и
кондиционирование колонки
Готовую насадку (5 % ОV-210 на
Газхроме Q) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под
вакуумом, колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к
детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 270 °С в течение 10 -
12 ч.
8.2. Приготовление рабочих
растворов для градуировки прибора
Для приготовления основного
стандартного раствора октаацетата сахарозы с концентрацией 1,0 % масс. во
взвешенную на аналитических весах мерную колбу вместимостью 100 см3
помещают 1,0 г октаацетата сахарозы, добавляют спирт этиловый ректификованный
до общей массы содержимого колбы 80,0 г.
Для приготовления рабочего
стандартного раствора октаацетата сахарозы с массовой долей 0,2 % масс. в
мерную колбу вместимостью 50 см3 помещают 10 см3
основного стандартного раствора, добавляют спирт этиловый ректификованный до
метки.
Для приготовления рабочих
стандартных растворов октаацетата сахарозы с массовой долей 0,01; 0,02; 0,05;
0,1 % масс. в пять мерных колб вместимостью 100 см3 помещают по 10,
5, 2 и 1 см3 основного стандартного раствора, добавляют спирт
этиловый ректификованный до метки.
Растворы хранятся в
холодильнике в течение 3 месяцев.
8.3. Отбор проб
Отбор проб проводится в
соответствии с ГОСТ 5964-93.
8.4. Установление и контроль градуированной
характеристики
Для построения
градуировочного графика в испаритель хроматографа вводят по 0,5 мм3 рабочих
стандартных растворов с содержанием 0,01; 0,02; 0,05; 0,1 и 0,2 % масс.
Осуществляют не менее 5
параллельных измерений. Находят среднее значение высоты хроматографического
пика для каждой концентрации.
Строят градуировочный график
зависимости высоты хроматографического пика от содержания октаацетата сахарозы
в растворе, % масс.
Градуировочный график
проверяют ежедневно по одному-двум стандартным растворам различной
концентрации. Если получаемые результаты отличаются более чем на 10 % от
данных, заложенных на графике, градуировочную характеристику строят заново,
используя свежеприготовленные рабочие стандартные растворы.
8.5. Условия хроматографирования градуированных и
анализируемых растворов
Хроматограф газовый
«Цвет-570» с пламенно-ионизационным детектором.
Неподвижная фаза - Газхром Q (0,16
- 0,20 мм) с 5 % ОV-210.
Колонка стеклянная, длиной 1
м, внутренним диаметром 3 мм.
Рабочая шкала
электрометра 32
× 109 Ом.
Скорость
движения ленты самописца 240
мм/ч.
Температура
термостата колонки 270
°С;
детектора 320
°С;
испарителя 280
°С.
Скорость
газа-носителя (азота) (60
± 2) см3/мин;
водорода (30
± 1) см3/мин;
воздуха 200
см3/мин.
Объем
вводимой пробы 0,5
мкл.
Абсолютное
время удерживания (185
± 1) с.
Линейный
диапазон детектирования 0,01
- 0,20 % масс.
Пробу анализируемого
вещества в количестве 0,5 мм3 вводят в колонку при помощи
микрошприца через головку испарителя, прокалывая резиновую мембрану. Иглу
вводят на полную длину и быстро впрыскивают пробу.
Среднюю высоту пика вычисляют
по результатам двух последовательных вводов пробы.
Образцы, дающие пики,
большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,2 % масс. разбавляют
этанолом.
Массовую концентрацию
октаацетата сахарозы в пробе (% масс.) определяют по градуировочному графику,
построенному методом абсолютной калибровки.
За окончательный результат
анализа принимается среднее арифметическое (Сcр.) результатов двух параллельных определений,
допустимые расхождения между которыми не должны превышать ± 23 %. Указывается
значение погрешности результата ∆ (% масс.):
, где
δ - граница допускаемой
погрешности измерения массовой концентрации октаацетата сахарозы (п. 2), % масс.
Результат измерения должен
заканчиваться тем же десятичным разрядом, что и погрешность. Результаты
измерений оформляются записью в журнале и удостоверяются специалистом,
проводившим измерения.
Внутренний оперативный
контроль (ВОК) качества результатов измерений проводят в соответствии с
требованиями ГОСТ
Р 8.563-96 и МИ 2335-95.
11.1. Контроль погрешности
измерений
Внутренний оперативный
контроль погрешности измерений проводят в лаборатории до и после проведения
серии измерений рабочих проб. Образцами для контроля служат градуировочные
стандартные растворы октаацетата сахарозы с массовыми концентрациями 0,01;
0,02; 0,05; 0,1 и 0,2 % масс. Процедура контроля состоит в приготовлении
растворов по п. 8.2, определении
содержания октаацетата сахарозы в образцах по п. 9.
Измерения считают
соответствующими нормативу оперативного контроля погрешности, если выполняется
условие:
|Х - Хm| < 0,01 × Хт × К, где
К - норматив оперативного
контроля погрешности, равный 13 %;
X
- результат
определения концентрации октаацетата сахарозы, % масс.;
Хт - содержание октаацетата
сахарозы в контрольном растворе, % масс.
При превышении норматива
оперативного контроля погрешности эксперимент повторяют. При повторном
превышении норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным
результатам контроля, и устраняют их.
Результаты контрольных
измерений заносят в рабочий журнал.
11.2. Контроль сходимости
результатов параллельных измерений
Внутренний оперативный
контроль сходимости результатов параллельных определений осуществляют в
процессе измерений по размаху результатов.
Решение об
удовлетворительной сходимости принимают при выполнении условия:
, где
X1 и Х2
- результаты двух определений концентрации октаацетата сахарозы, % масс.;
-
среднее арифметическое X1 и Х2, % масс.;
D - норматив оперативного
контроля воспроизводимости измерений, равный 23 %.
При превышении норматива оперативного
контроля сходимости проводят два дополнительных измерения, отбрасывают
наибольший и наименьший результат и проводят повторный контроль сходимости. При
превышении норматива измерения приостанавливают, выясняют причины, приводящие к
неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.
Результаты измерений заносят
в рабочий журнал.
Юдина Т.В., Федорова Н.Е.,
Волчек С.И., Волкова В.Н. (ФНЦГ им. Ф.Ф. Эрисмана).
СОДЕРЖАНИЕ
